如何推薦色譜柱
在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì)自行開發,他們的類型結(jié)構(gòu)模樣、極性、酸堿性應用擴展、分子量大小等等
1.樣品是極性的且弱酸性的過程中;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測(cè)振奮起來,即要選擇承受100%純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱建立和完善。
2. 如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng)增多;可以選擇CN啟用,NH2,或硅膠柱估算,HILIC(親水色譜)活動上,也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng),對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密深入各系統,否 則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)大型,另外離子對(duì)試劑很難洗下來(lái),基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))進一步推進。
3. 若樣品是堿性的不可缺少;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等)明確相關要求,他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾服務為一體,一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留特點。
4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng)相互配合,或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(cè)(優(yōu)點(diǎn)是方法開發(fā)簡(jiǎn)單品質,缺點(diǎn)是目前實(shí) 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少積極回應,價(jià)格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測(cè)堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱(缺點(diǎn) 是不能用來(lái)分析其它樣品深化涉外,對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密全會精神,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn))也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。